期刊详情 INFORMATION
刊名：山西医科大学学报
主管：山西省教育厅
主办：山西医科大学
主编：郭政
周期：月刊
语种：中文
出版地：山西省太原市
开本：16开
ISSN：1007-6611
CN： 14-1216/R
邮发代号：22-11
复合影响因子：0.434
综合影响因子：0.316
被以下数据库收录
获奖情况：
中国科技类核心期刊
中国科技论文统计源期刊
美国CA源期刊
俄罗斯AJ刊源
山西省一级期刊
国外数据库收录：
CA 化学文摘(美)(2011)
期刊荣誉：
Caj-cd规范获奖期刊
pSilencer 3.1-Sirt3基因RNA干扰表达载体的构建及鉴定
作 者： 曲璇 李军
关键词： Sirtuin-3 RNA干扰 载体构建
摘 要：目的 构建Sirt3基因的RNA干扰载体,并在真核细胞中进行pSilencer 3 1-Sirt3的功能鉴定 方法 利用体外DNA合成技术及液相色谱纯化技术合成Sirt3干扰序列,通过酶切将干扰序列连接至pSilencer 3 1载体中,将阳性克隆载体转入感受态大肠杆菌细胞后,筛选阳性克隆,通过第二代体外DNA测序技术进行序列测定 将测序正确的克隆用于Westernblot实验和real time PCR实验,以对其在真核细胞中的正确表达和内源性Sirt3的干涉效果进行鉴定 结果 PCR扩增得到序列测定结果与干扰序列完全一致 构建的pSilencer 3 1-Sirt3质粒在AGS和SGC-7901细胞中进行基因的转染,pSilencer3 1-Sirt3能够有效抑制内源性Sirt3的mRNA水平和蛋白质水平的表达 结论 成功构建获得Sirt3干扰载体,并有效降低Sirt3的mRNA和蛋白质水平的表达,为今后Sirt3的功能研究提供良好的基础
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