期刊详情 INFORMATION

刊名:山西医科大学学报
主管:山西省教育厅
主办:山西医科大学
主编:郭政
周期:月刊
语种:中文
出版地:山西省太原市
开本:16开
ISSN:1007-6611
CN: 14-1216/R
邮发代号:22-11
复合影响因子:0.434
综合影响因子:0.316
被以下数据库收录
获奖情况:
中国科技类核心期刊
中国科技论文统计源期刊
美国CA源期刊
俄罗斯AJ刊源
山西省一级期刊
国外数据库收录:
CA 化学文摘(美)(2011)
期刊荣誉:
Caj-cd规范获奖期刊
SCN5A基因L812Q突变体细胞模型的建立与细胞定位
作 者: <i> 倪磊 许德晖 刘利英 王爱英 汪鲁敏 西安交通大
关键词: BRUGADA综合征 SCN5A基因 基因突变 细胞定位
摘 要:目的建立SCN5A基因L812Q突变体细胞模型,并细胞定位。方法应用重叠PCR的方法构建SCN5A基因L812Q突变;以pMD19-T载体克隆SCN5A基因L812Q突变体;SCN5A-L812Q通过EcoRⅠ和ACCⅠ限制性内切酶位点插入表达载体质粒pEGFP-C1-hH1中,测序鉴定;将构建好的p EGFP-C1-hH1-L812Q突变型质粒、pEGFP-C1-hH1野生型质粒瞬时转染进入HEK293细胞,通过免疫荧光检测L812Q突变的细胞定位;将pEGFP-C1-hH1、pEGFP-C1-hH1-L812Q和pEGFP-C1-hH1+pEGFP-C1-hH1-L812Q分别转染进入HEK293细胞,用Western blot方法分析L812Q突变体的表达。结果测序结果显示pEGFP-C1-hH1-L812Q表达载体构建成功。荧光检测验证,野生型SCN5A主要定位在细胞膜上,而突变型定位在细胞质中。通过Western blot分析发现,突变型通道蛋白在细胞质中的表达量高于野生型。结论本研究成功构建了SCN5A基因突变载体pEGFP-C1-hH1-L812Q,证明SCN5A基因L812Q突变型主要定位在细胞质中。
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