期刊详情 INFORMATION
刊名：山西医科大学学报
主管：山西省教育厅
主办：山西医科大学
主编：郭政
周期：月刊
语种：中文
出版地：山西省太原市
开本：16开
ISSN：1007-6611
CN： 14-1216/R
邮发代号：22-11
复合影响因子：0.434
综合影响因子：0.316
被以下数据库收录
获奖情况：
中国科技类核心期刊
中国科技论文统计源期刊
美国CA源期刊
俄罗斯AJ刊源
山西省一级期刊
国外数据库收录：
CA 化学文摘(美)(2011)
期刊荣誉：
Caj-cd规范获奖期刊
S100A6基因过表达慢病毒载体的构建、转染及鉴定
作 者： <i> 李洁 胡进 马力天 叶欣 南岩东 吴大方 解放军
关键词： 慢病毒载体 A549细胞 S100A6基因
摘 要：目的构建S100A6基因重组慢病毒质粒,经293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,并感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达。方法 PCR扩增S100A6基因序列,将目的基因与酶切线性化载体p Len O-DCE定向连接,转化E Coli DH5α感受态细胞,对阳性重组子进行DNA测序及比对。将构建成功的目的质粒和辅助包装质粒共转染293T细胞生产病毒液,荧光显微镜观察报告基因在293T细胞中的荧光表达,判断重组慢病毒的感染效率。用得到的病毒液转染人肺腺癌A549细胞,real-time PCR和Western blot检测转染A549细胞后S100A6蛋白和S100A6 mRNA的表达。结果测序提示重组慢病毒质粒构建成功;荧光显微镜观察显示在包装细胞中获得较高的转染效率。real-time PCR检测显示A549细胞中有S100A6 mRNA表达;Western blot显示S100A6蛋白在A549细胞中稳定表达。结论成功构建S100A6基因慢病毒表达载体,并成功感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达,为S100A6基因功能及特性的研究和探索提供了实验基础。