期刊详情 INFORMATION

刊名:山西医科大学学报
主管:山西省教育厅
主办:山西医科大学
主编:郭政
周期:月刊
语种:中文
出版地:山西省太原
开本:16开
ISSN:1007-6611
CN: 14-1216/R
邮发代号:22-11
复合影响因子:0.434
综合影响因子:0.316

被以下数据库收录

获奖情况:
中国科技类核心期刊
中国科技论文统计源期刊
美国CA源期刊
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山西省一级期刊
国外数据库收录:
CA 化学文摘(美)(2011)
期刊荣誉:
Caj-cd规范获奖期刊


siRNA干扰HSP900t表达对人肝癌HepG2细胞影响的研究



作  者: 王晓捷 尹强兵 马晓姣 邹飞 陈雪梅
关键词: HSP90 RNA干扰 HepG2细胞 HSP90 ; RNA interference; HepG2 cells siRNA干扰HSP900t表达对人肝癌HepG2细胞影响的研究

摘  要:目的用RNA干扰方法建立稳定的热休克蛋白90α(HSP90α)抑制表达细胞株,研究热休克蛋白90α抑制表达对人肝癌HepG2细胞生物学行为的影响。方法将人HSP90αRNA干扰基因片段连接入pSilencer 2 1-U6 neo载体,重组质粒pSilencerHSP90经亚克隆、纯化、测序鉴定后,用电穿孔法转染到人肝癌细胞系HepG2细胞内。经G418筛选后,阳性克隆被进一步分离培养,形成稳定的HSP90α抑制表达细胞株。将此细胞株作为siRNA干扰组,将未转染的HepG2细胞作为对照组。用荧光定量PCR,免疫印迹检测siRNA对HSP90α的抑制效果,采用CCK-8法测定其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响。结果测序表明HSP90α干扰序列完全正确;siRNA干扰组HSP90αmRNA水平降低,蛋白表达量也有明显的减少;与对照组相比,siRNA干扰组在48 h后可明显抑制细胞增殖,流式细胞术检测siRNA干扰组细胞有明显的G2 M期细胞周期阻滞。结论建立稳定低表达HSP90α的HepG2细胞株;下调HepG2细胞内HSP90α的基因表达可抑制细胞增殖,引起明显的细胞周期阻滞。HSP90α靶向siRNA干扰为肝癌的基因治疗提供了可能。


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